형광 이미징
-형광 현미경(fluorescence microscopy)은 특정 타깃에 결합된 형광 탐침(fluorophore)을 이용해, 고대비·고선택적으로 세포 내 구조물이나 분자의 위치를 시각화하는 기술입니다. 고강도 여기광을 조사하면 형광 분자가 짧은 파장의 빛을 흡수한 후, 고유의 긴 파장 형광을 방출하며, 이 방출광만을 선택적으로 검출함으로써 배경 간섭 없이 타깃 신호를 선명하게 분리할 수 있습니다. 복수 형광 채널을 이용한 멀티플렉싱이 가능하고, 면역염색, live-cell imaging, subcellular localization 등 다양한 연구 목적에 유연하게 대응합니다. 특히 신호대잡음비(SNR)가 우수하여 미세 구조 관찰과 low-abundance 타깃 검출에 효과적입니다. 형광 표지 기술과 함께 적용하면 정량 분석도 가능해, 진단, 약물 작용 검증, 세포 신호 연구 등에서 핵심 도구로 활용됩니다.
-형광 실험으로는 IF (Immunofluorescence), ICC (Immunocytochemistry), IHC (Immunohistochemistry), Live-cell imaging, FRET, FRAP, FLIM, Ca²⁺ imaging, Subcellular organelle labeling, Transfection 확인 (GFP, RFP 등)을 주로 측정, 관찰합니다.
-주요 기능으로는
다채널 형광 이미지 획득 (Multi-channel acquisition), Z-stack 이미지 수집 (Z축 연속 촬영), 타임랩스 (Time-lapse imaging), 멀티포인트 촬영 (Multi-point acquisition), 자동 포커스 유지 (Auto Focus, Perfect Focus System), 고해상도 stitching (타일 이미지 자동 합성), ROI 선택 및 분석 (Region of Interest), 다이크로익 미러 및 필터 자동 전환, 형광 시료 퇴색 최소화를 위한 저조도 촬영, 자동 노출 및 밝기 보정, 3D 이미지 재구성 (Z-stack 기반), 형광 신호 정량화 (Intensity analysis), 세포 카운팅 및 면적 측정, 형광 시료 분광 분석 (Spectral imaging), 라이브 셀 관찰을 위한 환경 제어(온도, CO₂ 등), 보고서 생성 및 이미지 주석 삽입, AI 기반 이미지 분석 기능 (신형 소프트웨어 탑재 시)
나중에는 주요 기능 하나 하나 사진 설명 첨부 생각중
Nikon 형광 현미경으로 이미징한 sample
형광 이미징 가능 제품 라인업
도립 현미경
도립 현미경
-세포 배양용 디쉬(Cell culture dish, chamber slide 등)에서 직접 관찰이 가능하도록 설계됨
-대물렌즈가 아래에 위치하여, 배양 중인 세포를 교란 없이 관찰 가능
-Live-cell imaging, 타임랩스 촬영, 배양세포 실험에 최적화
-슬라이드 글라스를 거꾸로 뒤집어 커버글라스 면으로 관찰하기도 함
주로 사용하는 샘플:
배양세포 (HeLa, RAW264.7, MEF 등)
실시간 반응 관찰 (ex. 세포이동, 약물 반응)
live-cell 형광 실험 (ex. GFP-tagged 단백질)
Ca²⁺ imaging, time-lapse, transfection 확인 등
도립 현미경
정립 현미경
-슬라이드 글라스 위의 고정된 시료(Fixed sample)를 관찰하는 데 적합한 구조
-대물렌즈가 위에 위치하여, 염색된 조직절편이나 고정 세포 샘플 관찰에 유리
-조직학, 병리학, 미생물학 등에서 널리 사용
-명시야, 위상차, DIC, 형광 관찰 모두 가능
주로 사용하는 샘플:
염색된 조직절편 (H&E, Masson's trichrome, PAS 등)
고정 세포 슬라이드 (ICC, IHC, 비형광 IF)
혈액 도말 슬라이드 (Wright, Giemsa)
박테리아 슬라이드 (Gram, Ziehl-Neelsen 등)
식물/곤충 등 고정 표본 슬라이드
Band Filter system
현미경 내부의 필터 큐브 또는 다이크로익 미러 시스템은 특정 파장만 통과시키는 필터로 구성되어 있어서 사용자에 맞게 세팅이 가능합니다.
Long Pass Filter (LP) : 기준 파장보다 긴 파장(방출광)을 통과시키고, 짧은 파장(여기광)은 차단합니다.
예: LP 500 → 500nm 이상만 통과
Short Pass Filter (SP) : 기준 파장보다 짧은 파장만 통과, 긴 파장은 차단합니다. > 주로 여기광(excitation) 경로에서 사용됩니다.
예: SP 600 → 600nm 이하의 빛만 통과, 그 이상은 차단합니다.
Narrow Band Filter (NBP) : 매우 좁은 범위의 특정 파장만 통과시키는 협대역 밴드패스 필터입니다. 배경 신호를 최소화하고, 정밀한 파장 선택이 필요할 때 사용됩니다.
예: BP 525/10 → 520~530nm 범위만 통과합니다.
Band Pass Filter (BP) : 정해진 파장 범위만 통과시키는 필터입니다.
예: BP 525/50 → 500~550nm 범위만 통과합니다.
Dual Band / Multi Band Filter
두 개 이상의 파장 범위를 동시에 통과시키는 필터
→ 멀티채널 형광 이미징 시 사용 (예: GFP + RFP 동시 관찰)
스펙
